Active Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) (APB083Ra01)

Супероксиддисмутаза [Cu-Zn] внеклеточная (SOD2) - это антиоксидантный фермент, кодируемый геном SOD2 и катализирующий дисмутацию супероксид-радикалов в пероксид водорода и кислород. Активность рекомбинантной крысиной SOD2 определяли по способности ингибировать автоокисление пирогаллола в слабочелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана-HCl. Реакцию проводили путем добавления 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола к 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl с последующим быстрым перемешиванием при 25 °C; кинетику реакции регистрировали в течение 3 минут при длине волны 325 нм (контроль холостой пробы - 50 ммоль/л Tris-HCl), поддерживая скорость автоокисления пирогаллола на уровне 0,70 оптической единицы/мин. Для анализа различные концентрации рекомбинантной крысиной SOD2 вносили в 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl, инкубировали 20 мин при 25 °C, после чего добавляли 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола в каждую лунку, быстро перемешивали и регистрировали кинетику при 325 нм в течение 3 минут. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование скорости автоокисления пирогаллола в минуту. Удельная активность рекомбинантной крысиной SOD2 составила 390 Ед/мг.