Active Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) (APA117Hu04)

Супероксиддисмутаза 3 (SOD3), кодируемая геном SOD3, представляет собой антиоксидантный фермент, катализирующий дисмутацию супероксид-радикалов в пероксид водорода и кислород. Активность рекомбинантной человеческой SOD3 определяли по способности ингибировать автоокисление пирогаллола в слабо щелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана-HCl. Реакцию проводили путем добавления 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола к 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl с последующим быстрым перемешиванием при 25 °C; кинетику реакции регистрировали в течение 3 минут при длине волны 325 нм (контроль по холостой пробе с 50 ммоль/л Tris-HCl), контролируя скорость автоокисления пирогаллола на уровне 0,70 оптической единицы/мин. Различные концентрации рекомбинантной человеческой SOD3 вносили в 200 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl, инкубировали 20 минут при 25 °C, после чего в каждую лунку добавляли 8 мкл 5 ммоль/л пирогаллола, быстро перемешивали и регистрировали кинетику при 325 нм в течение 3 минут. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование скорости автоокисления пирогаллола в минуту. Удельная активность рекомбинантной человеческой SOD3 составила 94,8 Ед/мг.