Active Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) (APA117Mu01)

Супероксиддисмутаза 3 (SOD3), кодируемая геном SOD3, представляет собой антиоксидантный фермент, катализирующий дисмутацию супероксид-радикалов в пероксид водорода и кислород. Активность рекомбинантной мышиной SOD3 определяли по способности ингибировать автоокисление пирогаллола в слабо щелочном буферном растворе (pH 8,2) на основе трис(hydroxymethyl)аминометана (Tris-HCl). Реакцию проводили путем добавления 30 мкл 50 ммоль/л пирогаллола к 900 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl в кювете объемом 1,5 мл (длина оптического пути 1,0 см), быстро перемешивали при 25°C и регистрировали оптическую плотность при 325 нм каждые 30 с шесть раз (нулевую точку устанавливали по 50 ммоль/л Tris-HCl); скорость автоокисления пирогаллола контролировали на уровне 0,70 ед. оптической плотности в минуту. Затем к 900 мкл 50 ммоль/л Tris-HCl добавляли рекомбинантную SOD3 в различных концентрациях, инкубировали 20 мин при 25°C, после чего в каждую пробирку вносили 30 мкл 50 ммоль/л пирогаллола, быстро перемешивали и регистрировали оптическую плотность при 325 нм каждые 30 с шесть раз. В данных условиях единицей активности принято количество фермента, обеспечивающее 50%-ное ингибирование скорости автоокисления пирогаллола в минуту.