Active Vascular Endothelial Growth Factor 121 (VEGF121) (APB851Hu01)

Фактор роста эндотелия сосудов А (VEGFA) представляет собой белок, который может подвергаться протеолитическому расщеплению с образованием нескольких изоформ, включая VEGF121. Данная изоформа индуцирует пролиферацию эндотелиальных клеток, стимулирует их миграцию, ингибирует апоптоз и повышает проницаемость кровеносных сосудов. Принято считать, что изоформа VEGF121 специфически стимулирует пролиферацию эндотелиальных клеток вен. В связи с этим был проведен анализ пролиферативной активности рекомбинантного человеческого VEGF121 на клеточной линии ECV-304. Кратко: клетки ECV-304 высевали в трех повторностях в 96-луночные планшеты из расчета 2000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем питательную среду заменяли на бессывороточную стандартную среду RPMI-1640 перед добавлением VEGF121 в различных концентрациях. После 48 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Для этого в каждую лунку планшета добавляли по 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37°C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Результаты микроскопического анализа пролиферации клеток ECV-304 после 48-часовой инкубации с VEGF121 представлены на рисунке 1. Оценка жизнеспособности клеток методом CCK-8 после 48-часовой инкубации с рекомбинантным человеческим VEGF121 показана на рисунке 2. Было установлено, что VEGF121 достоверно повышает жизнеспособность клеток ECV-304.