Active Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) (APA143Ra61)

Фактор роста эндотелия сосудов А (VEGF-A), являющийся гликозилированным митогеном, известен как фактор сосудистой проницаемости и фактор роста эндотелиальных клеток, секретируемый гладкомышечными и эндотелиальными клетками. Сообщается, что VEGF-A индуцирует повышение сосудистой проницаемости и рост сосудов, стимулирует миграцию моноцитов/макрофагов, ингибирует апоптоз клеток и проявляет другие биологические эффекты. Для оценки влияния VEGF-A на пролиферацию клеток эндотелиальной линии ECV304 клетки высевали в трех повторностях в лунки 96-луночных планшетов из расчета 2000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи для адгезии. Затем питательную среду заменяли на стандартную бессывороточную среду DMEM перед добавлением VEGF-A в различных концентрациях. После 72 часов инкубации клетки исследовали с помощью инвертированного микроскопа, а пролиферацию клеток оценивали с использованием набора Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Кратко: в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8, после чего планшет инкубировали при 37 °C в течение 1–4 часов и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм на микропланшетном ридере. Данные о пролиферации клеток ECV304 после 72-часовой инкубации с VEGF-A, полученные при микроскопическом исследовании, представлены на рисунке 1.

На рисунке 2 представлена кривая зависимости «доза-эффект» для VEGFA. Было показано, что VEGFA достоверно стимулирует пролиферацию клеток линии ECV304. Значение ED50 для данного эффекта обычно составляет от 5,58 до 9,98 нг/мл.