4-Hydroxynonenal Rabbit mAb (A26085)

Клетки HeLa (отрицательный контроль, слева) и клетки HeLa, обработанные 4-гидроксиноненалем (справа), в количестве 1×10⁶ клеток были подвергнуты внутриклеточному окрашиванию с использованием моноклонального кроличьего антитела к 4-гидроксиноненалю (A26085, 2 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с ФИТЦ. В качестве холостого контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).

Клетки HeLa (обработанные 4-гидроксиноненалем) в количестве 1×10^6 были подвергнуты внутриклеточному окрашиванию с использованием изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2 мкг/мл, слева) или моноклонального кроличьего антитела к 4-гидроксиноненалу (A26085, 2 мкг/мл, справа), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с FITC.

Проведено конфокальное микроскопирование клеток HeLa, обработанных 4-гидроксиноненалем (4-HNE), и необработанных клеток с использованием моноклонального кроличьего антитела к 4-гидроксиноненалу (A26085, разведение 1:200) с последующей инкубацией с козьими антителами против IgG кролика (H+L), конъюгированными с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красная флуоресценция). Для контрастного окрашивания применяли моноклональное мышиное антитело к α-тубулину (AC012, разведение 1:400) с последующей инкубацией с козьими антителами против IgG мыши (H+L), конъюгированными с ABflo® 488 (AS076, разведение 1:500) (зеленая флуоресценция). Ядра клеток окрашивали DAPI (синяя флуоресценция). Увеличение объектива: 100x.