Acetyl-Histone H3-K14 Rabbit pAb (A7254)

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток линии U-2 OS с использованием поликлонального кроличьего антитела к ацетилированному гистону H3 (лизин 14) (A7254) в разведении 1:100 (объектив 40x). Клетки U-2 OS предварительно инкубировали с трихостатином А (TSA) в концентрации 1 мкМ при 37 °C в течение 18 часов. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синяя флуоресценция).

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии C6 с использованием поликлонального кроличьего антитела к ацетилированному гистону H3 (по лизину 14) (A7254) в разведении 1:400. Клетки C6 предварительно инкубировали с трихостатином А (TSA, 1 мкМ) при 37 °C в течение 18 часов. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. На дорожку наносили 25 мкг общего белка. Блокирование несpecificного связывания осуществляли с помощью 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток NIH/3T3 с использованием поликлонального кроличьего антитела к ацетилированному гистону H3 (лизин 14) (A7254) в разведении 1:400. Клетки NIH/3T3 предварительно инкубировали с трихостатином А (TSA, 1 мкМ) при 37 °C в течение 18 часов. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.