Acetyl-Histone H4-K5 Rabbit mAb (A23080)

Проведен анализ иммунопреципитации хроматина (ChIP) экстрактов клеток линии HeLa с использованием антитела к ацетилированному гистону H4 по лизину 5 (Acetyl-Histone H4-K5, артикул A23080) и кроличьего IgG (в качестве контроля). Количество иммунопреципитированной ДНК оценивали методом количественной ПЦР (qPCR). Гистограмма построена на основе соотношения количества иммунопреципитированной ДНК к количеству входной ДНК (input).

Проведен анализ методом вестерн-блоттинг лизатов клеток HeLa, обработанных трихостатином А (TSA, 1 мкМ) при 37 °C в течение 18 часов. Образцы белков (25 мкг на дорожку) были разделены электрофорезом и перенесены на мембрану. Блокирование неспецифического связывания осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием кроличьего моноклонального антитела к ацетилированному гистону H4 (по лизину 5) (A23080) в разведении 1:10 000 и вторичного антитела — козьего антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированного с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. Визуализацию выполняли с применением набора ECL Basic Kit (RM00020) при времени экспозиции 30 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток C2C12, обработанных трихостатином А (TSA, 1 мкМ) при 37 °C в течение 18 часов. Образцы белков (25 мкг на дорожку) были разделены электрофорезом, перенесены на мембрану и инкубированы с кроличьим моноклональным антителом к ацетилированному гистону H4 (лизин 5) (A23080) в разведении 1:10 000. Блокирование неспецифического связывания осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10 000. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.