Cas9 Rabbit mAb (A27269)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток рапса, трансфицированных Cas9. Образцы нагружали по 10 нг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Инкубацию с первичным моноклональным кроличьим антителом к Cas9 (A27269) проводили в разведении 1:1000 в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. Детекцию выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 90 с.

Клетки 293T, трансфицированные CAS9, были визуализированы методом конфокальной микроскопии с использованием моноклонального кроличьего антитела к Cas9 (A27269, разведение 1:200). Детекцию проводили с помощью козьих антикроличьих антител к тяжелым и легким цепям IgG, конъюгированных с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красная флуоресценция). Ядра клеток окрашивали DAPI (синяя флуоресценция). Увеличение объектива: 100x.