CD10 Rabbit mAb (A25707)

Клетки 293T (отрицательный контроль, слева) и трансфицированные клетки 293T (справа) в количестве 1×10^6 были окрашены на поверхности с использованием моноклонального кроличьего антитела к CD10 (A25707, 2 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с Alexa Fluor® 647. В качестве отрицательного контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).

Клетки 293T после трансфекции в количестве 1×10^6 были окрашены по поверхностным антигенам с использованием изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2 мкг/мл, слева) или моноклонального кроличьего антитела к CD10 (A25707, 2 мкг/мл, справа), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с Alexa Fluor® 647.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток дикого типа (WT) и клеток линии 293F, трансфицированных геном CD10. Мембраны инкубировали с моноклональным кроличьим антителом к CD10 (A25707) в разведении 1:3000 в течение ночи при 4°C. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. Нагрузка составляла 30 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции — 60 с.