CD272/BTLA Rabbit mAb (A24611)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к CD272/BTLA (A24611) в разведении 1:1000 при инкубации в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 180 с.

Клетки C2C12 (отрицательный контроль, слева) и спленоциты мышей линии C57BL/6 в количестве 1×10^6 клеток были окрашены на поверхности с использованием моноклонального кроличьего антитела к CD272/BTLA (A24611, 2 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля ABflo® 647 Rabbit IgG (A22070, 2 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с Alexa Fluor® 647. В качестве холостого контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).

Спленоциты мышей линии C57/BL6 в количестве 1×10^6 клеток были окрашены по поверхностным антигенам с использованием изотипического контроля ABflo® 647 Rabbit IgG (A22070, 2 мкг/мл, слева) или моноклонального кроличьего антитела к CD272/BTLA (A24611, 2 мкг/мл, справа).