CD62E Rabbit mAb (A26341)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток дикого типа (WT) и клеток линии 293T, трансфицированных геном CD62E. Мембраны инкубировали с первичным моноклональным кроличьим антителом к CD62E (A26341) в разведении 1:1000 в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела использовали козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. На дорожку наносили 20 мкг общего белка. Блокирование неспецифического связывания осуществляли с помощью 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.

Клетки 293T, трансфицированные CD62E, были визуализированы методом конфокальной микроскопии с использованием моноклонального кроличьего антитела к CD62E (A26341, разведение 1:200) с последующей инкубацией с козьим анти-кроличьим IgG (H+L), конъюгированным с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.

Клетки CHO (отрицательный контроль, слева) и трансфицированные клетки CHO (справа) в количестве 1×10^6 были окрашены на поверхности с использованием моноклонального кроличьего антитела к CD62E (A26341, 2 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с фикоэритрином (PE). В качестве отрицательного контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).