Cleaved Gasdermin D (Gly276) Rabbit mAb (A26924)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток THP-1 с использованием кроличьего моноклонального антитела к расщепленному газдермину D (по остатку Gly276) (A26924) в разведении 1:1000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4°C. Клетки THP-1 предварительно обрабатывали липополисахаридом (ЛПС) в концентрации 1 мкг/мл при 37°C в течение 8 часов. В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) козьи антитела против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10 000. На дорожку наносили 30 мкг общего белка. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 45 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов рекомбинантного белка GSDMD с использованием моноклонального кроличьего антитела к расщепленному газдермину D (Gly276) (A26924) в разведении 1:1000 при инкубации в течение ночи при 4°C. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка составляла 5 нг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020); время экспозиции — 45 с.