CTCF Rabbit mAb (A19588)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к CTCF (A19588) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составила 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 30 с.

Проведен анализ иммунопреципитации 300 мкг экстракта клеток линии 293T с использованием 3 мкг антител к CTCF (A19588). Вестерн-блоттинг иммунопреципитата выполняли с применением тех же антител к CTCF (A19588) в разведении 1:1000.

Иммунопреципитацию хроматина (ChIP) выполняли с использованием 25 мкг сшитого хроматина, полученного из клеток линии 293T, и 5 мкг моноклонального кроличьего антитела к CTCF (A19588). Подготовка библиотек ДНК проводилась с применением набора Scale ssDNA-seq Lib Prep Kit for Illumina V2 (RK20228). Результаты секвенирования ChIP демонстрируют картину обогащения CTCF в репрезентативном геномном регионе, окружающем ген MYC.