FGG Rabbit mAb (A28534)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к FGG (A28534) в разведении 1:10 000. Инкубацию первичных антител осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 ч. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). В качестве отрицательного контроля (NC) использовали клетки линии DU 145. Время экспозиции составило 45 с.

Клетки Hep G2 были проанализированы методом конфокальной микроскопии. Образцы инкубировали с моноклональным кроличьим антителом к FGG (A28534, разведение 1:200), после чего проводили детекцию с помощью козьего антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированного с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Для контрастного окрашивания использовали моноклональное мышиное антитело к α-тубулину (AC012, разведение 1:400) с последующей инкубацией с козьим антителом против IgG мыши (H+L), конъюгированным с ABflo® 488 (AS076, разведение 1:500) (зеленый сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани почки человека с использованием моноклонального кроличьего антитела к FGG (A28534) в разведении 1:2000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).