FN1 Rabbit mAb (A28529)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к фибронектину 1 (FN1) (A28529) в разведении 1:10 000 при инкубации в течение ночи при температуре 4 °C. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). В качестве отрицательного контроля (NC) использовали клетки линии PANC-1. Время экспозиции составило 1 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии Hep G2 с использованием кроличьего моноклонального антитела к фибронектину 1 (FN1) (арт. A28529) в разведении 1:10 000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4 °C. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (арт. AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование неспецифического связывания проводили с использованием 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (арт. RM00020). Время экспозиции составило 30 с.

Иммунопреципитацию фибронектина 1 (FN1) из 300 мкг экстракта клеток линии Hep G2 проводили с использованием 2 мкг кроличьего моноклонального антитела к FN1 (A28529). В качестве контроля использовали кроличий контрольный IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали буфером Лэммли (1x). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением кроличьего моноклонального антитела к FN1 (A28529) в разведении 1:5000.