FUNDC1 Rabbit mAb (A27503)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к FUNDC1 (A27503) в разведении 1:13 000. Инкубацию первичного антитела осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 ч. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 90 с.

Иммунопреципитацию белка FUNDC1 проводили из 300 мкг экстракта мозга мыши с использованием 2 мкг моноклонального кроличьего антитела к FUNDC1 (A27503). В качестве контроля использовали изотипическое кроличье антитело IgG (AC005). Элюцию образцов после иммунопреципитации осуществляли в буфере Лэммли (1×) без восстановителя. Дорожка «Input» соответствовала 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов проводили с применением моноклонального кроличьего антитела к FUNDC1 (A27503) в разведении 1:5000.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани карциномы толстой кишки человека с использованием моноклонального кроличьего антитела к FUNDC1 (A27503) в разведении 1:1000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).