Human IgD Rabbit mAb (A23036)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к человеческому IgD (A23036) в разведении 1:3000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10000. На дорожку вносили по 25 мкг белка. Блокирование осуществляли с помощью 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 180 с.

Клетки Jurkat (отрицательный контроль, слева) и человеческие мононуклеарные клетки периферической крови (ЧМКПК, справа) в количестве 1×10^6 клеток были окрашены на поверхности с использованием моноклонального кроличьего антитела к человеческому IgD (A23036, 2 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля ABflo® 647 Rabbit IgG (A22070, 5 мкл/тест, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с Alexa Fluor® 647. В качестве отрицательного контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).

Человеческие мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) в количестве 1×10^6 были окрашены по поверхности с использованием изотипического контроля ABflo® 647 Rabbit IgG (A22070, 2 мкг/мл, слева) или моноклонального кроличьего антитела к человеческому IgD (A23036, 2 мкг/мл, справа).