IL2 Rabbit mAb (A27745)

Проведено конфокальное микроскопирование клеток Jurkat, обработанных комбинацией ФМА, кальцимицина и БФА, а также необработанных клеток. Окрашивание выполняли с использованием моноклонального кроличьего антитела к IL2 (A27745, разведение 1:200) с последующей инкубацией с козьими антикроличьими антителами против IgG (H+L), конъюгированными с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красная флуоресценция). Ядра клеток окрашивали DAPI (синяя флуоресценция). Увеличение объектива: 100x.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии Jurkat с использованием моноклонального кроличьего антитела к IL2 (A27745) в разведении 1:5000. Инкубацию проводили при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Клетки Jurkat предварительно обрабатывали в течение 8 часов форбол-12-миристат-13-ацетатом (PMA/TPA, 40 нМ), кальцимицином (2 мкМ) и брефельдином А (300 нг/мл). В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) козьи антитела против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование осуществляли с помощью 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 60 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга рекомбинантного белка интерлейкина-2 человека (IL-2) с использованием моноклонального кроличьего антитела к IL-2 (A27745) в разведении 1:3000. Инкубацию первичного антитела осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 ч. В качестве вторичного антитела применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. На дорожку геля наносили 0,5 нг лизата/белка. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 30 с.