Integrin alpha V (ITGAV/CD51) Rabbit mAb (A19071)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к интегрину альфа V (ITGAV/CD51) (A19071) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 1 с.

Клетки Daudi (отрицательный контроль, слева) и HUVEC (справа) в количестве 1×10^6 были подвергнуты внутриклеточному окрашиванию с использованием моноклонального кроличьего антитела к интегрину альфа V (ITGAV/CD51) (A19071, 2,5 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2,5 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с ФИТЦ (разведение 1:200). В качестве холостого контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).

Клетки Daudi (отрицательный контроль, слева) и BEWO (справа) в количестве 1×10⁶ были подвергнуты внутриклеточному окрашиванию с использованием моноклонального кроличьего антитела к интегрину альфа V (ITGAV/CD51) (A19071, 2,5 мкг/мл, оранжевая линия) или изотипического контроля кроличьего IgG (AC042, 2,5 мкг/мл, синяя линия), после чего проводили окрашивание поликлональным козьим антителом против IgG кролика, конъюгированным с ФИТЦ (разведение 1:200). В качестве холостого контроля («blank control») использовали клетки, не окрашенные флуоресцентными красителями (красная линия).