[KD Validated] Bcl-2 Rabbit mAb (A19693)

Иммунопреципитацию белка Bcl-2 из 200 мкг экстракта ткани легкого мыши проводили с использованием 3 мкг моноклонального кроличьего антитела к Bcl-2 (A19693, валидировано методом нокаута гена). В качестве контроля использовали нормальные кроличьи IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали буфером Лэммли (1×). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением того же моноклонального кроличьего антитела к Bcl-2 (A19693) в разведении 1:1000.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани миндалин человека с использованием валидированного методом нокаута гена (KD) моноклонального кроличьего антитела к Bcl-2 (A19693) в разведении 1:2000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием валидированного методом нокаута гена (KD) моноклонального кроличьего антитела к Bcl-2 (A19693) в разведении 1:7000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4°C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составила 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 45 с.