[KD Validated] ECH1 Rabbit mAb (A27290)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов сердца мыши с использованием валидированного методом нокаута гена (KD validated) моноклонального кроличьего антитела к ECH1 (A27290) в разведении 1:12 000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4 °C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составила 25 мкг на лунку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 10 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии 293T дикого типа (WT) и клеток с нокдауном гена ECH1 (KD). Образцы загружали по 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Мембраны инкубировали с первичным моноклональным кроличьим антителом к ECH1 (валидировано для нокдауна, артикул A27290) в разведении 1:12 000 в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела использовали козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Детекцию сигналов проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020) при времени экспозиции 10 с.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани пищевода человека с использованием валидированного методом нокаута гена (KD) моноклонального кроличьего антитела к ECH1 (A27290) в разведении 1:6000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).