[KD Validated] LAMP1/CD107a Rabbit mAb (A21194)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии U-251MG с использованием кроличьего моноклонального антитела к LAMP1/CD107a (валидировано методом нокаута гена, артикул A21194) в разведении 1:10 000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции — 20 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток HeLa дикого типа (WT) и клеток с нокаутом гена LAMP1 (KD). Образцы загружали по 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с применением кроличьего моноклонального антитела к LAMP1/CD107a (A21194, валидировано для нокаута), разведенного 1:10 000, и вторичного антитела — козьего антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированного с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. Визуализацию выполняли с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020) при времени экспозиции 20 с.

Проведено конфокальное микроскопирование клеток линий HeLa и HeLa-LAMP1-KD с использованием валидированного для нокаута моноклонального кроличьего антитела к LAMP1/CD107a (A21194, разведение 1:200). Детекцию осуществляли с помощью вторичных антител — поликлональных козьих антител против IgG кролика (H+L), конъюгированных с Cy3 (AS007, разведение 1:500, красный сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.