[KD Validated] POLR2L Rabbit mAb (A25872)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием валидированного методом нокаута гена (KD validated) моноклонального кроличьего антитела к POLR2L (A25872) в разведении 1:2200 при инкубации в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 15 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии 293T, трансфицированных siRNA против POLR2L (валидация нокдауна). Мембраны инкубировали с кроличьим моноклональным антителом к POLR2L (A25872) в разведении 1:2000 в течение ночи при 4°C. В качестве вторичного антитела использовали козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020); время экспозиции — 1 с.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани миндалин человека с использованием валидированного методом нокдауна (KD) моноклонального кроличьего антитела к POLR2L (A25872) в разведении 1:3000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).