[KO Validated] DBI Rabbit PolymAb® (A28141PM)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии 293T дикого типа (WT) и клеток с нокаутом гена DBI (KO). Образцы загружали по 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с применением поликлонального кроличьего антитела к DBI (A28141PM, валидировано на нокауте) в разведении 1:5000 (инкубация при комнатной температуре в течение 1,5 ч) и вторичного антитела — козьего антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированного с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Визуализацию выполняли с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020); время экспозиции составило 20 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных лизатов с использованием поликлонального кроличьего антитела к DBI (валидировано на нокауте, A28141PM) в разведении 1:5000. Инкубацию первичного антитела осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 часов. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 20 с.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани поджелудочной железы человека с использованием поликлонального кроличьего антитела к DBI (валидировано на нокауте, A28141PM) в разведении 1:2000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).