[KO Validated] KEAP1 Rabbit mAb (A25951)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием кроличьего моноклонального антитела к KEAP1 (валидировано на нокауте, артикул A25951) в разведении 1:1000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4 °C. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 90 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии MCF7 с использованием кроличьего моноклонального антитела к KEAP1 (валидировано на нокауте, артикул A25951) в разведении 1:1000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4 °C. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP, артикул AS014), в разведении 1:10 000. На дорожку геля наносили 25 мкг белка. Блокирование мембраны проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии 293T дикого типа (WT) и с нокаутом гена KEAP1 (KO). Образцы загружали по 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Инкубацию с первичным моноклональным кроличьим антителом к KEAP1 (A25951, валидировано для нокаута) проводили в разведении 1:1000 в течение ночи при 4°C. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 30 с.