[KO Validated] Smad4 Rabbit mAb (A19116)

Проведен анализ иммунопреципитации 300 мкг экстракта клеток 293T с использованием 3 мкг антител к Smad4 (A19116). Вестерн-блоттинг иммунопреципитата выполняли с применением антител к Smad4 (A19116) в разведении 1:1000.

Проведен анализ хроматин-иммунопреципитации (ChIP) экстрактов клеток линии HepG2 с использованием валидированного на нокауте моноклонального кроличьего антитела к Smad4 (A19116) и кроличьего IgG (изотипический контроль). Количество иммунопреципитированной ДНК оценивали методом количественной ПЦР (qPCR). Гистограмма построена на основе соотношения количества иммунопреципитированной ДНК к количеству входной ДНК (input).

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием кроличьего моноклонального антитела к Smad4 с валидацией на нокаутных клетках ([KO Validated] Smad4 Rabbit mAb, артикул A19116) в разведении 1:1000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4 °C. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию сигналов выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 3 секунды.