Ly-6G Rabbit mAb (A22270)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к Ly-6G (A22270) в разведении 1:11 000 (инкубация в течение ночи при 4 °C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). В качестве отрицательного контроля (NC) использовали лизат клеток линии NIH/3T3. Время экспозиции составило 45 с.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани селезенки мыши с использованием моноклонального кроличьего антитела к Ly-6G (A22270) в разведении 1:4000 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в буфере Tris-EDTA (0,01 М, pH 9,0).

Проведено конфокальное микроскопирование включенной в парафин ткани селезенки мыши с использованием моноклонального кроличьего антитела к Ly-6G (A22270, разведение 1:800). Детекцию осуществляли с помощью козьих антител против IgG кролика (H+L), конъюгированных с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Перед иммунофлуоресцентным окрашиванием проводили высокотемпературную антигенную реставрацию в цитратном буфере (0,01 М, pH 6,0). Увеличение объектива: 40x.