AP1422, вестерн-блоттинг, лизаты клеток A-431 (26181)
Проведен анализ методом вестерн-блот лизатов клеток линии A-431 с использованием моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000. Клетки A-431 были обработаны каликулином А (100 нМ) при 37 °C в течение 30 минут после ночной инкубации в среде без сыворотки. В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) поликлональные козьи антитела против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10 000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Enhanced Kit (RM00021). Время экспозиции — 60 с.
AP1422, вестерн-блоттинг, лизаты клеток NIH 3T3 (26182)
Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток NIH 3T3 (контроль) и клеток NIH 3T3, обработанных каликулином А. Клетки подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, после чего инкубировали с каликулином А (100 нМ) при 37 °C в течение 30 минут. Окрашивание выполняли с использованием моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование проводили в 3% растворе обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с использованием набора ECL Enhanced Kit (RM00021), время экспозиции составило 60 с.
AP1422, иммунопреципитация, экстракты клеток A-431 (26183)
Иммунопреципитацию пан-фосфо-треонина из 300 мкг экстрактов клеток A-431, обработанных каликулином А (200 нМ, 30 мин), проводили с использованием 2 мкг моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422). В качестве контроля использовали кроличий контрольный IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали восстанавливающим буфером Лэммли (1×). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000.
моноклональное антитело от производителя ABClonal к источник — кролик предназначено для детекции целевого антигена в биологических образцах. Продукт характеризуется подтвержденной реактивностью к человек.
Преимущества
Высокая специфичность и аффинность
Концентрация:
Оптимизированный состав буфера: PBS, 50% глицерин и 0.05% БСА, Proclin-300 или азид натрия, pH 7.3
Стабильность: 12 месяцев
Применение в исследованиях
Антитело валидировано для методов: ELISA, IP, WB. Подходит для научных исследований в области иммунологии, клеточной биологии и молекулярной диагностики.
Условия хранения
Срок годности: 12 месяцев. Хранить при -20 С. Избегать повторяющихся циклов замерзания/оттаивания. Рекомендуется соблюдать температурный режим при транспортировке и хранении.
Иммуноген
Синтетический пептид в районе сайта фосфорилирования human Threonine
AP1422, вестерн-блоттинг, лизаты клеток A-431 (26181)
Проведен анализ методом вестерн-блот лизатов клеток линии A-431 с использованием моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000. Клетки A-431 были обработаны каликулином А (100 нМ) при 37 °C в течение 30 минут после ночной инкубации в среде без сыворотки. В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) поликлональные козьи антитела против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10 000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Enhanced Kit (RM00021). Время экспозиции — 60 с.
AP1422, вестерн-блоттинг, лизаты клеток NIH 3T3 (26182)
Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток NIH 3T3 (контроль) и клеток NIH 3T3, обработанных каликулином А. Клетки подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, после чего инкубировали с каликулином А (100 нМ) при 37 °C в течение 30 минут. Окрашивание выполняли с использованием моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование проводили в 3% растворе обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с использованием набора ECL Enhanced Kit (RM00021), время экспозиции составило 60 с.
AP1422, иммунопреципитация, экстракты клеток A-431 (26183)
Иммунопреципитацию пан-фосфо-треонина из 300 мкг экстрактов клеток A-431, обработанных каликулином А (200 нМ, 30 мин), проводили с использованием 2 мкг моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422). В качестве контроля использовали кроличий контрольный IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали восстанавливающим буфером Лэммли (1×). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением моноклонального кроличьего антитела к пан-фосфо-треонину (AP1422) в разведении 1:1000.
