Pan Phospho-Tyrosine Mouse mAb (AP0973)

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток NIH-3T3 с использованием мышиного моноклонального антитела к пан-фосфотирозину (AP0973) в разведении 1:100 (объектив 40x). Ядра клеток окрашены DAPI (синий сигнал).

Проведен анализ методом вестерн-блот различных клеточных лизатов с использованием мышиного моноклонального антитела к пан-фосфотирозину (AP0973) в разведении 1:1000. Инкубацию первичных антител осуществляли в течение ночи при температуре 4°C. Клетки линий Jurkat и NIH/3T3 предварительно обрабатывали периванадатом (1 мМ) при 37°C в течение 30 минут. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG мыши (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (AS003), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составляла 30 мкг на лунку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции — 30 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии C6 с использованием мышиного моноклонального антитела к пан-фосфотирозину (AP0973) в разведении 1:1000. Инкубацию первичного антитела осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Клетки C6 предварительно обрабатывали периванадатом (1 мкМ) при 37 °C в течение 30 минут. В качестве вторичного антитела использовали козье антитело против IgG мыши (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS003), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составляла 30 мкг на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 10 с.