Pan Phospho-Tyrosine Rabbit pAb (AP0905)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии Jurkat с использованием поликлонального антитела к пан-фосфотирозину (Pan Phospho-Tyrosine pAb, AP0905) в разведении 1:1000. Клетки Jurkat предварительно инкубировали с периванадатом (1 мМ) при 37 °C в течение 30 минут. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование осуществляли с использованием 3% раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА). Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 1 с.

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток линии C6 с использованием антитела к пан-фосфотирозину (Pan Phospho-Tyrosine, AP0905) в разведении 1:100. В качестве вторичного антитела применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Клетки C6 подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, после чего обрабатывали 20% фетальной бычьей сывороткой (FBS) при 37 °C в течение 20 минут.

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток NIH/3T3 с использованием антитела к пан-фосфотирозину (Pan Phospho-Tyrosine, AP0905) в разведении 1:100. В качестве вторичного антитела применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Клетки NIH/3T3 подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, после чего стимулировали добавлением 20% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) и инкубировали при 37°C в течение 20 минут.