PD-L1/CD274 Rabbit mAb (A26086)

Биотинилированный белок PD-L1/CD274 (1 мкг/мл) инкубировали с моноклональным кроличьим антителом к PD-L1/CD274 (A26086) или контрольным моноклональным антителом в условиях серийных разведений в течение 1 часа при комнатной температуре. Полученную смесь вносили в лунки планшета для ИФА, предварительно покрытых рекомбинантным белком PD-1 (1 мкг/мл). Детекцию биотинилированного белка PD-L1/CD274 осуществляли с использованием стрептавидина, конъюгированного с пероксидазой хрена (HRP).

Клетки KARPAS-299 исследовали методом конфокальной микроскопии с использованием моноклонального кроличьего антитела к PD-L1/CD274 (A26086, разведение 1:200). Детекцию проводили с помощью козьих антител против IgG кролика (H+L), конъюгированных с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красная флуоресценция). Ядра клеток окрашивали DAPI (синяя флуоресценция). Увеличение объектива: 100x.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии A549 с использованием моноклонального кроличьего антитела к PD-L1/CD274 (A26086) в разведении 1:1000. Инкубацию проводили в течение ночи при температуре 4°C. Клетки A549 предварительно обрабатывали интерфероном гамма (IFN-γ) в концентрации 100 нг/мл при 37°C в течение 48 часов. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. На дорожку наносили 30 мкг общего белка. Блокирование осуществляли с помощью 3% раствора обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 90 с.