Phospho53-S9 Rabbit pAb (AP0085)

Проведен анализ иммунопреципитации 200 мкг экстракта клеток 293T с использованием 3 мкг поликлонального антитела к фосфорилированному p53 (Ser9) (AP0085). Клетки 293T подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, затем обрабатывали УФ-излучением при комнатной температуре в течение 30 минут и далее инкубировали с 10% эмбриональной бычьей сывороткой (FBS) при 37°C в течение 30 минут. Вестерн-блоттинг иммунопреципитата выполняли с применением того же поликлонального антитела к фосфорилированному p53 (Ser9) (AP0085) в разведении 1:1000.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линий 293 и HT-29 с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному p53 (Ser9) (AP0085) в разведении 1:1000. Клетки 293 и HT-29 подвергали воздействию УФ-излучения в течение 15–30 минут. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА). Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции — 3 минуты.