Phospho-β-Catenin-S675 Rabbit pAb (AP0795)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии C6 с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному β-катенину (Ser675) (AP0795) в разведении 1:1000. Лизаты клеток C6 предварительно обрабатывали щелочной фосфатазой теленка (CIP) при 37°C в течение 1 часа. В качестве вторичных антител применяли козьи антитела против IgG кролика (H+L), конъюгированные с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА). Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Enhanced Kit (RM00021), время экспозиции — 180 с.

Проведен иммунофлуоресцентный анализ ткани толстой кишки мыши (образцы, обработанные λ-протеинфосфатазой, и необработанные образцы) с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному β-катенину (Ser675) (AP0795) в разведении 1:100 (увеличение объектива 40x). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Перед иммунофлуоресцентным окрашиванием выполняли высокотемпературную демаскировку антигенов в цитратном буфере (0,01 М, pH 6,0).

Проведен иммунофлуоресцентный анализ ткани толстой кишки крысы (обработанной λPP) и интактной ткани толстой кишки крысы с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному β-катенину (Ser675) (AP0795) в разведении 1:100 (объектив 40x). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Перед иммунофлуоресцентным окрашиванием выполняли высокотемпературную демаскировку антигенов в цитратном буфере (0,01 М, pH 6,0).