Phospho-Histone H2AX-S139 Rabbit pAb (AP0099)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток NIH/3T3 с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному гистону H2AX (по серину 139) (AP0099) в разведении 1:400. Клетки NIH/3T3 подвергали воздействию УФ-излучения при комнатной температуре в течение 15–30 минут. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 20 с.

Проведен анализ методом вестерн-блотт лизатов клеток линии C6 с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному гистону H2AX (по серину 139) (AP0099) в разведении 1:400. Клетки C6 подвергали воздействию УФ-излучения при комнатной температуре в течение 15–30 минут. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 20 с.

Проведен иммуногистохимический анализ парафиновых срезов ткани печени человека с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному гистону H2AX (Ser139) (AP0099) в разведении 1:100 (увеличение объектива 40x). Перед окрашиванием выполнена высокотемпературная демаскировка антигенов в цитратном буфере (0,01 М, pH 6,0).