Phospho-OLR2A CTD-S5 Rabbit mAb (AP0997)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием кроличьего моноклонального антитела к фосфорилированному по остатку серина-5 CTD домену POLR2A (Phospho-POLR2A CTD-S5, артикул AP0997) в разведении 1:1000. Клетки линии MCF7 обрабатывали доксорубицином (0,5 мкМ) при 37°C в течение 24 часов, нокодазолом (50 нг/мл) при 37°C в течение 20 часов или щелочной фосфатазой (CIP, 20 мкл на 400 мкл) при 37°C в течение 1 часа. Клетки линии C2C12 обрабатывали щелочной фосфатазой (CIP, 20 мкл на 400 мкл) при 37°C в течение 1 часа. В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) козьи антитела против IgG кролика (H+L) (артикул AS014) в разведении 1:10000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% раствора бычьего сывороточного альбумина (БСА). Детекцию осуществляли с помощью набора ECL Basic Kit (артикул RM00020). Время экспозиции — 1 секунда.

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток линии A-549 с использованием кроличьего моноклонального антитела к фосфорилированной по остатку серина-5 CTD домене POLR2A (Phospho-POLR2A CTD-S5 Rabbit mAb, артикул AP0997) в разведении 1:50 (объектив 40x). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с флуорофором Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток контрастировали красителем DAPI (синяя флуоресценция).

Проведен иммунофлуоресцентный анализ клеток HeLa с использованием моноклонального кроличьего антитела к фосфорилированной по остатку серина-5 CTD домене POLR2A (Phospho-POLR2A CTD-S5, артикул AP0997) в разведении 1:50 (объектив 40x). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с Cy3 (AS007), в разведении 1:500. Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал).