Phospho-Raf1-S259 Rabbit pAb (AP0497)

Проведен анализ иммунопреципитации экстрактов клеток HeLa (200 мкг) с использованием 3 мкг поликлонального антитела к фосфорилированному Raf1 (Ser259) (AP0497). Клетки HeLa подвергали голоданию по сыворотке в течение ночи, после чего обрабатывали 10% эмбриональной бычьей сывороткой (FBS) при 37°C в течение 30 минут. Вестерн-блоттинг иммунопреципитата выполняли с применением того же поликлонального антитела (AP0497) в разведении 1:1000.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток HeLa с использованием поликлонального кроличьего антитела к фосфорилированному Raf1 (Ser259) (AP0497) в разведении 1:1000. Клетки HeLa инкубировали с 10% эмбриональной бычьей сывороткой (FBS) после ночной депривации сывороткой. В качестве вторичного антитела применяли конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. На дорожку наносили 25 мкг белка. Блокирование осуществляли с использованием 3% раствора бычьего сывороточного альбумина (BSA).