RAB7 Rabbit mAb (A12308)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к RAB7 (A12308) в разведении 1:55 000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4 °C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 20 с.

Клетки U-2 OS были визуализированы методом конфокальной микроскопии с использованием кроличьего моноклонального антитела к RAB7 (A12308, разведение 1:2000) с последующей инкубацией с козьим анти-кроличьим IgG (H+L), конъюгированным с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Для контрастного окрашивания применяли мышиное моноклональное антитело к α-тубулину (AC012, разведение 1:400) с последующей инкубацией с козьим анти-мышиным IgG (H+L), конъюгированным с ABflo® 488 (AS076, разведение 1:500) (зеленый сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.

Клетки NIH/3T3 были проанализированы методом конфокальной микроскопии. Окрашивание проводили с использованием моноклонального кроличьего антитела к RAB7 (A12308, разведение 1:2000) с последующей инкубацией с конъюгированным с Cy3 козьим антителом против IgG кролика (H+L) (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Для контрастного окрашивания применяли моноклональное мышиное антитело к α-тубулину (AC012, разведение 1:400) с последующей инкубацией с конъюгированным с ABflo® 488 козьим антителом против IgG мыши (H+L) (AS076, разведение 1:500) (зеленый сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.