Rad21 Rabbit mAb (A19749)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к Rad21 (A19749) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на лунку. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Enhanced Kit (RM00021). Время экспозиции — 180 с.

Проведен анализ хроматин-иммунопреципитации (ChIP) экстрактов клеток линии A-549 с использованием антитела к Rad21 (A19749) и кроличьего IgG (в качестве контроля). Количество иммунопреципитированной ДНК оценивали методом количественной ПЦР (qPCR). Гистограмма построена на основе соотношения количества иммунопреципитированной ДНК к количеству входной ДНК (input).

Иммунопреципитацию хроматина (ChIP) проводили с использованием 10,7 мкг сшитого хроматина, выделенного из клеток линии A-549, и 5 мкг моноклонального кроличьего антитела к Rad21 (A19749). Подготовка библиотек ДНК осуществлялась с помощью набора Scale ssDNA-seq Lib Prep Kit for Illumina V2 (RK20228). Результаты секвенирования ChIP демонстрируют профиль обогащения Rad21 вдоль хромосомы 8 (верхняя панель) и в геномном регионе, охватывающем ген MYC, который является репрезентативным примером локуса, обогащенного Rad21 (нижняя панель).