Rpb1 CTD Rabbit mAb (A28326)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к CTD-домену Rpb1 (A28326) в разведении 1:8000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4°C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составила 25 мкг на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 1 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток HeLa с использованием моноклонального кроличьего антитела к CTD-домену Rpb1 (A28326) в разведении 1:8000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4 °C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка составляла 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 10 с.

Иммунопреципитацию хроматина (ChIP) проводили с использованием 15 мкг сшитого хроматина, выделенного из клеток линии HeLa. Для иммунопреципитации применяли 3 мкг моноклонального кроличьего антитела к CTD-домену Rpb1 (A28326) или изотипический контроль кроличьего IgG (AC042). Обогащение иммунопреципитированной ДНК на различных геномных локусах оценивали методом количественной ПЦР (qPCR). На гистограмме представлено соотношение количества иммунопреципитированной ДНК к количеству входной ДНК (input) для указанных локусов.