SERCA2/ATP2A2 Rabbit mAb (A11692)

Клетки Hep G2 были проанализированы методом конфокальной микроскопии. Окрашивание проводили с использованием моноклонального кроличьего антитела к SERCA2/ATP2A2 (A11692, разведение 1:100) с последующей инкубацией с козьим анти-кроличьим IgG (H+L), конъюгированным с Cy3 (AS007, разведение 1:500) (красный сигнал). Для контрастного окрашивания применяли моноклональное мышиное антитело к α-тубулину (AC012, разведение 1:400) с последующей инкубацией с козьим анти-мышиным IgG (H+L), конъюгированным с ABflo® 488 (AS076, разведение 1:500) (зеленый сигнал). Ядра клеток окрашивали DAPI (синий сигнал). Увеличение объектива: 100x.

Иммунопреципитацию SERCA2/ATP2A2 из 200 мкг экстракта клеток 293F проводили с использованием 0,5 мкг моноклонального кроличьего антитела к SERCA2/ATP2A2 (A11692). В качестве контроля для преципитации использовали кроличий контрольный IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали буфером Лэммли (1×). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением моноклонального кроличьего антитела к SERCA2/ATP2A2 (A11692) в разведении 1:1000.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных лизатов с использованием моноклонального кроличьего антитела к SERCA2/ATP2A2 (A11692) в разведении 1:10 000. Инкубацию первичного антитела осуществляли при комнатной температуре в течение 1,5 ч. В качестве вторичного антитела применяли конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10 000. Нагрузка белка составляла 25 мкг на дорожку. Блокирование проводили с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию выполняли с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции — 60 с.