TNF-α Rabbit mAb (A24214)

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга рекомбинантного белка TNF-α крысы (RP01322) с использованием моноклонального кроличьего антитела к TNF-α (A24214) в разведении 1:1000. В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. На дорожку вносили 5 нг лизата/белка. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020). Время экспозиции составило 10 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток RAW 264.7 с использованием кроличьего моноклонального антитела к TNF-α (A24214) в разведении 1:1000 (инкубация в течение ночи при 4°C). Клетки RAW 264.7 предварительно обрабатывали липополисахаридом (LPS, 1 мкг/мл) и брефельдином А (BFA, 300 нг/мл) в течение 8 часов. В качестве вторичного антитела использовали конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) козье антитело против IgG кролика (H+L) (AS014) в разведении 1:10000. На дорожку наносили 30 мкг белка. Блокирование осуществляли с помощью 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с использованием набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 90 с.