Active Carbonic Anhydrase VII (CA7) (APD074Mu01)

Карбоангидраза катализирует обратимую реакцию CO2 + H2O ⇌ HCO3- + H+, которая лежит в основе многих процессов, таких как дыхание, подкисление почечных канальцев и резорбция костной ткани. Карбоангидраза VII (CA7), кодируемая геном CA7, представляет собой цитозольный белок, преимущественно экспрессируемый в слюнных железах; возможны также дополнительные ткани локализации и функции. Например, исследования с использованием ингибиторов карбоангидразы свидетельствуют о том, что человеческая CA7 является изоферментом, ответственным за противосудорожную/противоэпилептическую активность сульфонамидов и сульфаматов. Действительно, в модели на крысах было показано, что CA7 действует как developmental switch в ГАМК-ергической сигнализации нейронов. Активность рекомбинантной мышиной CA7 оценивали по способности гидролизовать 4-нитрофенилацетат (4-NPA) до 4-нитрофенола. Реакцию проводили в буфере для анализа (12,5 мМ Tris, 75 мМ NaCl, pH 7,5), инициируя добавлением 50 мкл различных концентраций CA7 (разведенных в буфере для анализа) к 50 мкл 2 мМ субстрата 4-NPA (исходный раствор 100 мМ в ацетоне, разведенный в буфере для анализа). Инкубацию проводили при 37°C в течение 5 мин, после чего измеряли оптическую плотность при длине волны 400 нм.