Active Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1) (APA087Mu61)

На рисунке 2 показан хемотаксический эффект рекомбинантного мышиного белка MCP1 на клетки THP-1.

Белок хемотаксиса моноцитов 1 (MCP1), также известный как хемокин C-C-мотива 2 (CCL2), относится к подсемейству β (C-C) хемокинов и является хемоаттрактантом для моноцитов и базофилов. Мышиный CCL2 секретируется в виде мономера-гликопротеина с молекулярной массой 14 кДа, однако возможно образование нековалентных димеров. CCL2 наиболее известен как хемотаксический агент для мононуклеарных клеток. Для оценки хемотаксического эффекта рекомбинантного мышиного MCP1 на клеточную линию THP-1 был проведен анализ хемотаксиса с использованием 24-луночной системы микрохемотаксиса. Кратко: клетки THP-1 высевали в верхние камеры (150 мкл клеточной суспензии, 10⁶ клеток/мл в среде RPMI 1640 без добавления фетальной бычьей сыворотки), а в нижние камеры добавляли рекомбинантный мышиный MCP1 в различных концентрациях, разведенный в среде RPMI 1640 без сыворотки; камеры были разделены поликарбонатным фильтром с размером пор 8 мкм. После инкубации при 37 °C и 5% CO₂ в течение 1 ч фильтр удаляли, клетки в нижней камере визуализировали с помощью инвертированного микроскопа при малом увеличении (×100), а количество мигрировавших клеток подсчитывали при большом увеличении (×400) случайным образом (пять полей зрения на каждый фильтр). Результаты показали, что рекомбинантный мышиный MCP1 способен индуцировать миграцию клеток THP-1. Мигрировавшие клетки THP-1 в нижней камере при увеличении ×100 представлены на рисунке 1. Статистические данные приведены на рисунке 2. Оптимальная хемотаксическая активность MCP1 наблюдается при концентрации 0,1 нг/мл.