[KO Validated] JAK2 Rabbit mAb (A28566)

Иммунопреципитацию JAK2 из 200 мкг экстрактов клеток HEL проводили с использованием 1 мкг моноклонального кроличьего антитела к JAK2 (A28566, валидировано на нокауте). В качестве контроля для преципитации использовали кроличий контрольный IgG (AC005). Образцы после иммунопреципитации элюировали буфером Лэммли (1x). Дорожка «Input» представляла 10% от общего количества исходного материала. Вестерн-блоттинг иммунопреципитатов выполняли с применением моноклонального кроличьего антитела к JAK2 (A28566, валидировано на нокауте) в разведении 1:6000.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга лизатов клеток линии A549 дикого типа (WT) и клеток с нокаутом гена JAK2 (KO). Образцы загружали по 25 мкг белка на дорожку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Мембраны инкубировали с первичным моноклональным кроличьим антителом к JAK2 (валидировано на нокауте, артикул A28566) в разведении 1:6000 в течение ночи при температуре 4°C. В качестве вторичного антитела использовали козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Детекцию сигналов проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020) при времени экспозиции 90 с.

Проведен анализ методом вестерн-блоттинга различных клеточных лизатов с использованием валидированного на нокауте (KO) моноклонального кроличьего антитела к JAK2 (A28566) в разведении 1:6000 (инкубация проводилась в течение ночи при 4 °C). В качестве вторичного антитела применяли козье антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) (AS014), в разведении 1:10000. Нагрузка белка составила 25 мкг на лунку. Блокирование осуществляли с использованием 3% обезжиренного сухого молока в буфере TBST. Детекцию проводили с помощью набора ECL Basic Kit (RM00020), время экспозиции составило 90 с.